США J.S. et al. "Identification of stress-responsive genes in Streptococcus mutans by differential display reverse transcription-PCR", Infect. Immun., 2001, vol.69, p.2493-2501. RU 2111254 C1, 20.05.1998. WO 9701647 A2, 16.01.1997.
Имя заявителя:
Федеральное государственное учреждение здравоохранения "Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (RU)
Изобретатели:
Захарова Ирина Борисовна (RU) Викторов Дмитрий Викторович (RU) Подшивалова Мария Васильевна (RU) Алексеев Владимир Валерьевич (RU)
Патентообладатели:
Федеральное государственное учреждение здравоохранения "Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (RU)
Реферат
Изобретение раскрывает способ выявления экспрессирующихся генетических детерминант патогенных микроорганизмов рода Burkholderia с использованием реакций обратной транскрипции и сопряженной амплификации (ОТ-ПЦР) для их последующего структурно-функционального анализа. Способ включает этапы выращивания бактериальной культуры до ранней логарифмической фазы роста, выделения и очистки РНК методом нуклеосорбции из обработанной мертиолятом натрия бульонной культуры, удаления примесей ДНК обработкой ДНКазой, синтеза кДНК в присутствии ингибитора рибонуклеаз и праймера, специфичного последовательностям сайтов связывания с рибосомой мРНК прокариот, реамплификации кДНК с тем же праймером для накопления и использования ее в качестве матрицы в ген-специфической ПНР, выделения и определения нуклеотидной последовательности ампликонов. Способ позволяет оценить влияние адаптационных изменений клеток при изменении условий внешней среды на выраженность важнейших биологических характеристик микроорганизмов - вирулентность и устойчивость к антимикробным препаратам - с высокой степенью чувствительности при различных условиях внешней среды. 3 ил., 3 пр.