ЭУКАРИОТИЧЕСКАЯ КЛЕТКА - ХОЗЯИН ДЛЯ ЭКСПРЕССИИ ВИТАМИН К - ЗАВИСИМОГО БЕЛКА, ВЕКТОР ЭКСПРЕССИИ В ЭУКАРИОТИЧЕСКИХ КЛЕТКАХ, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГАММА - КАРБОКСИЛИРОВАННОГО ВИТАМИН К - ЗАВИСИМОГО БЕЛКА И СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ КОМПОЗИЦИИ ДЛЯ ИНДУКЦИИ СВЕРТЫВАНИЯ КРОВИ ИЛИ СТИМУЛИРОВАНИЯ ПОВЫШЕНИЯ ИЛИ ПОНИЖЕНИЯ КОАГУЛЯЦИИ
WO 0229045 A3, 11.04.2002. HALLGREN K.W. et al. Carboxylase overexpression effects full carboxylation but poor release and secretion of factor IX: implications for the release of vitamin K-dependent proteins, Biochemistry, 2002, v.41, n.50, p.15045-15055. LUCAS B.K. et al. High-level production of recombinant proteins in CHO cells using adicistronic DHFR intron expression vector, Nucleic Acids Res., 1996, v.24, n.9, p.l774-1779. RU 2122583 C1, 27.11.1998.
Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению гамма-карбоксилированного белка, и может быть использовано в медицине. Витамин К-зависимый белок получают путем выделения после культивирования эукариотической клетки, содержащей экспрессирующий вектор, который содержит молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую витамин К-зависимый белок и ассоциированные последовательности, контролирующие экспрессию. Ассоциированные последовательности содержат первый промотор и молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую гамма-глутамилкарбоксилазу, и второй промотор. В качестве первого промотора используют предранний промотор цитомегаловируса человека (hCMV), а в качестве второго промотора - предранний промотор SV40. При этом соотношение экспрессии витамин К-зависимого белка и гамма-глутамилкарбоксилазы составляет от 10:1 до 250:1. Изобретение позволяет получить гамма-карбоксилированный витамин К-зависимый белок в промышленных масштабах. 4 н. и 25 з.п. ф-лы, 3 ил., 6 табл.