YUJI SUZUKI et al., High-Level Production of Recombinant Human Parathyroid Hormone 1-34, Appl. Environ. Microbiol., 1998, v. 64, 2, p.526-529. WO 03100022 A2, 04.12.2003. DING BANG et al., Fusion protein Trx-PTH (1-34) of thioredoxin and parathyroid hormone PTH1-34, preparation method and use thereof, Database CA/STN N 145:286072, CN 1807456A (SHANGHAI SAIJIN BIOMEDICAL CO.), 26.07.2006. SU YONG et al., Preparation of PTH derivatives for inhibiting osteoclasts and treating osteoporosis, Database CA/STN N 136:335543, CN 1311256 A, 05.09.2001. GAGNON P., The Secrets of Orthogonal Process Design, 30.06.2006, p.1-4, найдено в Интернет [31.01.2011] по адресу: http:/www.validated.com/revalbio/pdffiles/orthopd.pdf. ЕА 8439 В1, 29.06.2007.
Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению рекомбинантных белков в Escherichia coli, и может быть использовано для синтеза паратиреоидного гормона человека (rhPTH (1-34)). Конструируют кДНК, кодирующую химерный нуклеотид ORF под контролем индуцибельного промотора, выбранного из группы, состоящей из araBAD, trp, T7, lac, Pho и trc, путем амплификации кДНК с помощью RT-PCR с использованием ген-специфических праймеров, кодирующих rhPTH (1-34) химерный гибридный белок, в котором химерный гибридный партнер по существу состоит из 41 аминокислот, полученных из 124-164 аминокислоты пептида бета-галактозидазы (LacZ) Escherichia coli. Затем экспрессируют химерный гибридный белок в присутствии лактозы в качестве индуктора в пределах около 10-30% общего белка на основе массы. Изобретение позволяет упростить и удешевить синтез rhPTH (1-34) за счет оптимизации его экспрессии в Escherichia coli. 11 з.п. ф-лы, 15 ил., 2 табл.
Поиск патентов
Получить полное описание патента