ФАДЕЕВА И.Ю. Пролиферативный антиген инициалей в исследовании морфогенетических процессов в культуре in vitro пшеницы: автореферат диссертации кандидата биологических наук: 03.00.04, 03.00.23. - Саратов, 25.04.2007. SU 1587724 А1, 15.05.1991. RU 2242512 С1, 20.12.2004. RU 2019190 С1, 15.09.1994. RU 2197500 С2, 27.01.2003. WO/2001/088162, 22.11.2001.
Имя заявителя:
Институт биохимии и физиологии растений и микроорганизмов Российской академии наук (RU)
Изобретатели:
Фадеева Ирина Юрьевна (RU) Евсеева Нина Васильевна (RU) Селиванов Николай Юрьевич (RU) Щеголев Сергей Юрьевич (RU)
Патентообладатели:
Институт биохимии и физиологии растений и микроорганизмов Российской академии наук (RU)
Реферат
Изобретение относится к биотехнологии и предназначено для получения моноспецифических антител к белкам растительных клеток. Получение очищенных белковых антигенов проводят с использованием методов хроматографии и электрофореза в полиакриламидном геле, при этом в качестве антигена используют маркерный белок меристематических клеток пшеницы. Полученные белковые антигены перед иммунизацией инкубируют в трис-HCl буферном растворе, содержащем додецилсульфат натрия и 2-меркаптоэтанол, в течение 12-24 часов при 2-10°С. Иммунизацию лабораторных животных проводят трехкратно с двухнедельными перерывами, при этом первую иммунизацию проводят в подколенные лимфоузлы порцией измельченного геля, содержащего антиген с полным адъювантом Фрейнда, а вторую и третью иммунизацию - в активные точки по брюшине порцией измельченного геля с неполным адъювантом Фрейнда. Получают из крови иммунизированных животных моноспецифическую сыворотку, содержащую антитела к исследуемым антигенам. Очистку антител проводят фракционированием антисыворотки каприловой кислотой с последующим обессоливанием и катионообменной хроматографией. Изобретение позволяет повысить специфичность и титр получаемых антител за счет введения дополнительных операций по их очистке. 5 з.п. ф-лы, 5 ил.