Смолянинов Александр Борисович (RU), ООО "Покровский банк стволовых клеток" (RU)
Изобретатели:
Смолянинов Александр Борисович (RU) Айзенштадт Александра Андреевна (RU) Котелевская Елена Александровна (RU) Иволгин Дмитрий Александрович (RU) Адылов Шерзоид Фархадович (RU) Логачёв Антон Алексеевич (RU) Хрупина Александрина Сергеевна (RU) Супильникова Ольга Владимировна (RU)
Патентообладатели:
Смолянинов Александр Борисович (RU) ООО "Покровский банк стволовых клеток" (RU)
Реферат
Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно, к выделению мезенхимальных стволовых клеток (МСК) из костного мозга и может быть использовано в медицине. Способ включает получение аспирата костного мозга (КМ) после пункции подвздошной кости, проведение анализов образца КМ на наличие инфекционных агентов и бактериальной контаминации. Затем образец КМ размещают в 15 мл гепариновой воды, полученной разбавлением 5 мл гепарина в 200 мл физиологического раствора. Готовят ростовую среду путем добавления к 45 мл среды МЕМ- или Advanced Stem Cell Media 5 мл фетальной бычьей сыворотки до концентрации не менее 10%, прогревая ее до температуры 37°С. После разбавления образца КМ раствором Хэнкса в 1,5-2 раза наслаивают суспензию КМ на фиколл в соотношении 30 мл суспензии на 15 мл фиколла и центрифугируют раствор с ускорением 800G в течение 30 мин, собирают 2 верхних слоя, причем нижний из этих слоев выполнен в виде белого кольца с выделением в нем чистых лейкоцитов. Переносят эти два слоя в пробирку, содержащую 7 мл культуральной среды МЕМ- или Anvanced Stem Cell Media, и центрифугируют полученный раствор с ускорением 400G в течение 5 мин, к осадку добавляют 5-10 мл ростовой среды и полученную суспензию пипетируют на 1-2 флакона с последующим культивированием стволовых клеток. Изобретение позволяет повысить однородность и качество получения популяции МСК с улучшением их чистоты.