RU 2422515 С2, 27.06.2011. VERHASSELT В. et al., Thymic Repopulation by CD34+ Human Cord Blood Cells After Expansion in Stroma-Free Culture, Blood, 1999, v.94, pp.3644-3652. LI N. et al., Human mesenchymal stem cells improve ex vivo expansion of adult human CD34(+) peripheral blood progenitor cells and decrease their allostimulatory capacity, ExpHematol, 2007, v.35 (3), pp.507-515. RITA С.et al., Clonal analysis of differentiating embryonic stem cells reveals a hematopoietic progenitor with primitive erythroid and adult lymphoid-myeloid potential, The Company of Biologists Limited, 2001, pp.4597-4604. GAUTAM D., Dysregulated Gene Expression During Hematopoietic Differentiation From Human Embryonic Stem Cells, Molecular Therapy, 2011, v 19(4), pp.768-781.
Имя заявителя:
Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научный центр "Научно-исследовательский институт органических полупродуктов и красителей" ФГУП "ГНЦ "НИОПИК" (RU), Учреждение Российской академии наук Институт общей генетики им. Н.И. Вавилова РАН (RU)
Изобретатели:
Киселев Сергей Львович (RU) Лагарькова Мария Андреевна (RU) Филоненко Елена Сергеевна (RU)
Патентообладатели:
Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научный центр "Научно-исследовательский институт органических полупродуктов и красителей" ФГУП "ГНЦ "НИОПИК" (RU) Учреждение Российской академии наук Институт общей генетики им. Н.И. Вавилова РАН (RU)
Реферат
Изобретение относится к области биохимии. Представлен способ экспансии CD34+ клеток, включающий комбинированное культивирование суспензия - подложка в бессывороточной среде ExVivo 15 с ростовыми факторами SCF 50 нг/мл, IL-3 20 нг/мл, IL-6 20 нг/мл, Flt-3 100 нг/мл, при этом в качестве подложки используются клетки ОР9, а культивирование осуществляют при 37°С, 5% CO2 в течение 12 дней и способ экспансии CD34+ клеток, включающий культивирование в среде следующего состава: среда StemXVivo Serum-Free HSC, содержащая 100 нг/мл CSF, 100 нг/мл FLT-3, 50 нг/мл ТРО, 20 нг/мл IL-3, X-Vivo 15, содержащая 30 нг/мл IL-3, 50 нг/мл SCF, 10 нг/мл IGF, 50 нг/мл FLT3L, 3 нг/мл GMCSF, 5 нг/мл IL-7, 10 нг/мл SCDF, при этом культивирование осуществляют при 37°С, 5% СО2 в течение 14 дней, и половина среды заменяется на свежую каждые три дня. Изобретение позволяет увеличить количество CD34+ клеток в 5 раз в течение 12 дней или в 30 раз в течение 14 дней, при этом после дифференцировки данные клетки не проявляют опухолевого фенотипа. 2 н.п. ф-лы, 3 ил.