На данной странице представлена ознакомительная часть выбранного Вами патента

Для получения более подробной информации о патенте (полное описание, формула изобретения и т.д.) Вам необходимо сделать заказ. Нажмите на «Корзину»

Вернуться к списку

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РЕСТРИКТАЗЫ E.CORII ИЗ ШТАММА БАКТЕРИЙ ESCHERICHIA COLI B 834/PSK 323

Номер публикации патента: 1321060

Вид документа:  A1  Страна публикации:  SU  Рег. номер заявки:  3816705		Получить полное описание патента

Реферат

Изобретение относится к способам выделения биологически активных веществ, в частности ферментных препаратов рестриктаз, применяемых в генной инженерии. Цель изобретения - повышение степени очистки фермента от неспецифических нуклеаз и повышение выхода фермента. Сущность изобретения заключается в том, что биомассу штамма Escherichia coli B 834/p SK 323 суспендируют в калий-фосфатном буфере, pH 7,0, добавляют дезинтегрирующую смесь: N-ацетилмурамидгликаногидролазу и алкилфенилполиэтиленгликоль при весовых соотношениях 0,9-1,1:190-210. После разрушения клеток ультразвуком фермент осаждают полиэтиленамином, добавляя его до концентрации 0,3%, ресуспендируют в калий-фосфатном буфере, pH 7,0, содержащем 0,4 М.KCl, осаждают сульфатом аммония. Последующее разделение метилаз и рестриктаз проводят на ДЭАЭ-целлюлозе при скорости нанесения и элюции фермента 25-35 мл/г и общем объеме элюэнта 9-11 объемов колонки. Дальнейшая очистка на фосфоцеллюлозе Р-11 проводится со скоростью 25-35 мл/ч. Фермент концентрируют диализом против рабочего буфера в течение 5-7 ч. 1 табл.

Вернуться к списку