На данной странице представлена ознакомительная часть выбранного Вами патента

Для получения более подробной информации о патенте (полное описание, формула изобретения и т.д.) Вам необходимо сделать заказ. Нажмите на «Корзину»

Вернуться к списку

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОЙ ПУРИННУКЛЕОЗИД - ФОСФОРИЛАЗЫ, РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК pERPUPHO1 И ШТАММ ESCHERICHIA COLI BL21(DE3)/pERPUPHO1 ДЛЯ ЕГО ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ

Номер публикации патента: 2179188

Вид документа:  C2  Страна публикации:  RU  Рег. номер заявки:  2000105214/13		Получить полное описание патента

Реферат

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к генной и белковой инженерии, и решает задачу получения высокопродуктивного рекомбинантного бактериального штамма-продуцента пуриннуклеозид-фосфорилазы. Рекомбинантная плазмидная ДНК рERPUPHO1, кодирующая аминокислотную последовательность пуриннуклеозид-фосфорилазы Е. coli, состоит из: NcoI/EcoRI-фрагмента ДНК плазмиды рЕТ23d, содержащего промотор и терминатор транскрипции Т7-РНК-полимеразы, усилитель трансляции гена 10 фага Т7, ген β-лактамазы, и NcoI/EcoRI-фрагмента ДНК, содержащего адаптированную к этим сайтам последовательность гена пуриннуклеозид-фосфорилазы Escherichia coli. Штамм-продуцент Е. coli ВL21(DE3)/рERPUPHO1, полученный трансформацией клеток Е.coli плазмидной ДНК рERPUPHO1, культивируют до накопления рекомбинантной пуриннуклеозид-фосфорилазы в количестве 60-70% от суммарного белка, клетки разрушают ультразвуком в буферном растворе и отделяют растворимую фракцию. Штамм-продуцент Е. coli ВL21(DE3)/рERPUPHO1 выращивают в богатой среде (YT-, LB-бульон и др.) (или индуцируют изопропилтио-β-D-галактозидом, и снова выращивают) до достижения максимальной плотности культуры. Изобретение позволяет получать пуриннуклеозид-фосфорилазу Е.coli с высоким выходом и по упрощенным технологиям. 3 с.п. ф-лы, 1 ил.

Вернуться к списку