BYRNE В. ЕТ AL., Nucl. Acids Res., 16(9), 4165, 1988. HUANG Z. ЕТ AL., Biotechniques, 20(6), 10212-1020, 1996. FALALEEVA M. ETAL., Abstracts of International Conference, Pushchno, June 2007. VESTER B. and WENGEL J., Biochemistry, 43(42), 13233-13241, 2004. KAUPINNEN S. ЕТ AL., Handb. Exp.Pharmacol., 173, 405-422, 2006.
Имя заявителя:
Российская Федерация в лице Федерального агентства по науке и инновациям (RU), Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт белка Российской Академии Наук (RU)
Изобретатели:
Четверин Александр Борисович (RU) Фалалеева Марина Витальевна (RU) Четверина Елена Владимировна (RU) Алексеев Яков Игоревич (RU)
Патентообладатели:
Российская Федерация в лице Федерального агентства по науке и инновациям (RU) Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт белка Российской Академии Наук (RU)
Реферат
Изобретение относится к области молекулярной биологии и биохимии и может быть использовано в молекулярной диагностике, связанной с выявлением РНК-мишеней. Предложен способ повышения специфичности обратной транскрипции, включающий приготовление образца, предположительно содержащего хотя бы один вид подлежащей обратной транскрипции РНК (мишени) и хотя бы один вид РНК, отличной от мишени; обработку его полинуклеотидфосфорилазой Thermus thermophilus (Tth ПНФазой) при температуре 60-75°С и микромолярной концентрации магния, проводимую после отжига исследуемого образца с защитным олигонуклеотидом, располагающимся по 3'-сторону от участка, подлежащего обратной транскрипции, и образующим с мишенью гибрид, стабильный в условиях инкубации; и реакцию обратной транскрипции, которую проводят с полученной на стадии предварительной обработки реакционной смесью без ее дополнительной очистки. 4 з.п. ф-лы, 7 ил., 11 пр.