РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК pER - Hir, КОДИРУЮЩАЯ ГИБРИДНЫЙ БЕЛОК, СПОСОБНЫЙ К АВТОКАТАЛИТИЧЕСКОМУ РАСЩЕПЛЕНИЮ С ОБРАЗОВАНИЕМ [Leu1, Thr2] - 63 - ДЕСУЛЬФАТОГИРУДИНА, ШТАММ Escherichia coli ER2566/pER - Hir - ПРОДУЦЕНТ УКАЗАННОГО БЕЛКА И СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГЕННО - ИНЖЕНЕРНОГО [Leu1, Thr2] - 63 - ДЕСУЛЬФАТОГИРУДИНА
Инструкция IMPACT-TWIN от 11.09.2007, найдена в Интернет <URL:http://ecoliwiki.net/colipedia/index.php/pTWIN1>, 29.06.2011. ЕР 0324712 А2, 19.07.1989. MADAN KATRAGADDA et al. Expression of compstatin in Escherichia coli: Incorporation of unnatural amino acids enhances its activity. Protein Expression and Purification, 2006 V.47, p.289-295.
Имя заявителя:
Учреждение Российской академии наук Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН (RU), Учреждение Российской академии медицинских наук Гематологический научный центр РАМН (RU)
Изобретатели:
Есипов Роман Станиславович (RU) Степаненко Василий Николаевич (RU) Костромина Мария Андреевна (RU) Мирошников Анатолий Иванович (RU) Воробьев Андрей Иванович (RU) Юрьев Андрей Серафимович (RU)
Патентообладатели:
Учреждение Российской академии наук Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН (RU) Учреждение Российской академии медицинских наук Гематологический научный центр РАМН (RU)
Реферат
Изобретение относится к области генной и белковой инженерии и касается рекомбинантной плазмидной ДНК pER-Hir, кодирующей гибридный белок, способный к автокаталитическому расщеплению с образованием [Leu1, Thr2]-63-десульфатогирудина, штамму Escherichia coli ER2566/pER-Hir - продуценту указанного белка и способу получения генно-инженерного [Leu1, Thr2]-63-десульфатогирудина. Представленная рекомбинантная плазмидная ДНК состоит из SapI/BamHI-фрагмента ДНК плазмиды pTWIN-1, содержащей промотор и терминатор транскрипции Т7-РНК-полимеразы, усилитель трансляции гена 10 фага Т7, ген -лактамазы (Ар), ген модифицированного мини-интеина Ssp DnaB, со встроенной в него последовательностью хитин-связывающего домена, и SapI/BamHI-фрагмента ДНК, содержащего последовательность гена рекомбинантного [Leu1, Thr2]-63-десульфато-гирудина-1, содержащую в качестве генетического маркера ген -лактамазы (Ар), и уникальные сайты узнавания рестрикционных эндонуклеаз, расположенные на следующем расстоянии влево от сайта BamHI: NruI - 186 п.о., NdeI - 594 п.о., XbaI - 882 п.о., EcoRV - 2913 п.о., HpaI - 2966 п.о. Изобретения позволяют получить рекомбинантный белок [Leu1, Thr2]-63-десульфатогирудин-1, который используют в качестве лекарственного препарата, применяемого для предотвращения гиперкоагуляции крови. 3 н.п. ф-лы, 1 ил.