На данной странице представлена ознакомительная часть выбранного Вами патента

Вернуться к списку

РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК pESG, ОПРЕДЕЛЯЮЩАЯ СИНТЕЗ ГИБРИДНОГО БЕЛКА, ОБЛАДАЮЩЕГО АНТИГЕННЫМИ СВОЙСТВАМИ ПОВЕРХНОСТНОГО ГЛИКОПРОТЕИДА ОБОЛОЧКИ ВИРУСА Т - КЛЕТОЧНОГО ЛЕЙКОЗА ЧЕЛОВЕКА 1 ТИПА (НТLV - 1), СПОСОБ ЕЕ КОНСТРУИРОВАНИЯ И ШТАММ БАКТЕРИЙ ESCHERICHIA COLI НВ 101/pESG - ПРОДУЦЕНТ ГИБРИДНОГО БЕЛКА

Номер публикации патента: 94030309

Вид документа:  A1  Страна публикации:  RU  Рег. номер заявки:  94030309

Реферат

Изобретение относится к области генетической инженерии и биотехнологии. Целью изобретения является создание рекомбинантной плазмидной ДНК, обеспечивающей высокий уровень продукции гибридного белка, обладающего антигенными свойствами поверхностного гликопротеида оболочки вируса Т-клеточного лейкоза человека 1 типа (HTLV-I) и способной наследоваться в штаммах бактерий E. coli, а так же создание штамма - продуцента этого белка. Рекомбинантная плазмидная ДНК pESG размером 5,6 т.п.н. состоит из SalG1 - BamH1 фрагмента (426 п.н.) последовательности области env HTLV-I и SalG1 фрагмента плазмиды pUR291 размером 5,2 т.п.н. с геном бета-галактозидазы, областью ori и генетическим маркером в виде bla-гена (устойчивость к ампициллину), имеет уникальные сайты рестрикции BamHI, PstI, HindIII, StuI, ClaI, Tth111-II. Поставленная цель достигается тем, что с помощью фермента рестрикции SalG1 из промежуточной плазмиды pBE1 вырезают фрагмент величиной 426 п.н. Этот фрагмент лигируют с линеанизированной гидролизом SalG1 формой ДНК плазмидного вектора pUR291. После соответствующей инкубации трансформируют полученным препаратом компетентные (обработанные CaCl₂) клетки E.coli с последующим отбором трансформантом их способности расти на среде, содержащей ампициллин. Использование заявляемого изобретения позволяет получать с 1 л суспензии клеток E.coli 400-500 мг гибридного белка, содержащего специфическую последовательность полипептида, кодируемого областью env генома HTLV-I.

Вернуться к списку