US 5759787 (TULARIK INC.), 02.06.1998. BOGE A., ROTH R., Anal. Biochem., 1995, 231 (2), 323-332. SIEMEISTER ET AL., J. Biol. Chem., 1995, 270(9), 4870-4874. FREUD G. ET AL., Biochem. Biophys. Res. Commun., 1995, 206(1), 272-278.
Изобретение относится к области биохимии и может быть использовано при поиске фармакологически активных соединений, обладающих белок-фосфорилирующей активностью или способностью модифицировать указанную активность. Предложен способ определения способности фермента изменять уровень фосфорилирования полипептида, предусматривающий проведение реакции исследуемого фермента с субстратом, в качестве которого используют биотинилированный фрагмент от 516 до 777 остатка человеческого субстрата рецептора инсулина 1 (hIRS-1-р30), связывание продукта реакции с иммобилизованным на носителе стрептавидином и определение уровня его фосфорилирования с помощью антител, специфичных в отношении фосфорилированных остатков полипептида. Способ по изобретению позволяет идентифицировать тирозиновые и сериновые протеинкиназы и может быть положен в основу тест-системы для поиска новых модуляторов их активности. 2 н. и 7 з.п. ф-лы, 7 ил.