OTSUJI S. et al. A NEW ENZYMATIC APPROACH FOR ESTIMATING TOTAL AND DIRECT BILIRUBIN. Clin. Biochem. 1988. Vol. 21. P.33-38. US 2007126680/13, 12.12.2005. US 2003106573/13, 07.09.2001.
Имя заявителя:
Учреждение Российской академии наук Институт биохимии и физиологии микроорганизмов им. Г.К. Скрябина Российской академии наук (RU)
Изобретатели:
Глухов Игорь Леонидович (RU) Шматченко Вадим Васильевич (RU) Леонтьевский Алексей Аркадьевич (RU)
Патентообладатели:
Учреждение Российской академии наук Институт биохимии и физиологии микроорганизмов им. Г.К. Скрябина Российской академии наук (RU)
Реферат
Изобретение относится к биотехнологии. Исследуемую сыворотку крови инкубируют в натрий фосфатном буфере, содержащем детергент и фермент, окисляющий билирубин. Измеряют оптическую плотность смеси при 450 нм. При этом в качестве фермента используют термостабильную бактериальную оксидазу из Bacillus pumilus, а концентрацию билирубина в образце рассчитывают по разнице величин оптической плотности контрольной и опытной проб, соотнесенной с калибровочным графиком. При определении концентрации билирубина с использованием калибратора концентрацию (С) билирубина в опытной пробе рассчитывают по формуле: С=(А2-А1/А4-А3)×Ск, где A1, А2 - оптическая плотность пробы после инкубации в присутствии и в отсутствие фермента, соответственно; А3, А4 - оптическая плотность калибратора после инкубации в присутствии и в отсутствие фермента, соответственно; Ск - концентрация билирубина в калибраторе. Наблюдаемое в ходе реакции уменьшение оптической плотности реакционной смеси при 450 нм прямо пропорционально концентрации общего билирубина в сыворотке. Изобретение предоставляет простой и надёжный способ, показывающий высокую точность анализа. 1 ил.