СТЕНКОВА А.Н. с соавт. Разработка многопраймеровой ПЦР для идентификации бактерий рода Yersinia и дифференциации патогенных видов Y.pestis, Y.pseudotuberculosis, Y.enterocolitica. Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. - М.: Мед., 3, 2008, с.18. WO 2004106553 А2, 09.12.2004. US 5654144 В, 05.08.1997. RU 2153671 С1, 27.07.2000. RU 2153172 С1, 20.07.2000. RU 2008684 С1, 28.02.1994.
Имя заявителя:
Федеральное государственное учреждение здравоохранения "Ростовский-на-Дону ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательский противочумный институт" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (RU)
Изобретатели:
Трухачев Алексей Леонидович (RU) Арсеньева Татьяна Евгеньевна (RU) Лебедева Светлана Александровна (RU) Алексеева Людмила Павловна (RU) Васильева Екатерина Анатольевна (RU)
Патентообладатели:
Федеральное государственное учреждение здравоохранения "Ростовский-на-Дону ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательский противочумный институт" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (RU)
Реферат
Сущность изобретения заключается в том, что исследуемую пробу изучают параллельно двумя способами: первый - в реакции непрямой иммунофлюоресценции (НИМФ), а второй - в полимеразной цепной реакции (ПЦР), причем НИМФ проводят с моноклональными антителами ВСКК (П-384Д и 434Д). Антитела взаимодействуют со специфическим для вида Y.pestis капсульным антигеном F1 или плазмидо-температуро-независимым поверхостным белком PFV, который имеется у всех штаммов Y.pestis и редких штаммов в R-форме Y. pseudotuberculosis. По свечению бактерий определяют присутствие в пробе полноценных или «бесфракционных» бактерий Y.pestis или типичных и PFV-атипичных штаммов Y.pseudotuberculosis. ПЦР выполняют с помощью двух пар праймеров «vlm33for/ISrevl754» - специфичных для вида Y.pestis и «JS» - специфичных для вида Y.pseudotuberculosis. Полученные с первой парой праймеров результаты оценивают как положительные при наличии ампликонов в 400 п.н., а второй пары - при наличии ампликонов в 223 п.н., идентификацию исследуемой пробы проводят путем совмещения результатов НИМФ и ПЦР с контрольными штаммами. Способ обеспечивает экспресс-идентификацию всех штаммов, принадлежащих к видам Y.pestis и Y.pseudotuberculosis, и их дифференциацию с высокой степенью достоверности. 8 табл.