Учреждение Российской академии наук Тюменский научный центр Сибирского отделения РАН (ТюмНЦ СО РАН) (RU), Петров Сергей Анатольевич (RU), Суховей Юрий Геннадьевич (RU)
Изобретатели:
Суховей Юрий Геннадьевич (RU) Петров Сергей Анатольевич (RU) Костоломова Елена Геннадьевна (RU) Тезелашвили Теа Нодаровна (RU) Шуман Анна Алексеевна (RU) Гизатулина Гузель Минханивовна (RU) Васильев Владимир Анатольевич (RU)
Патентообладатели:
Учреждение Российской академии наук Тюменский научный центр Сибирского отделения РАН (ТюмНЦ СО РАН) (RU) Петров Сергей Анатольевич (RU) Суховей Юрий Геннадьевич (RU)
Реферат
Изобретение относится к медицине и описывает способ получения тест-объекта для оценки цитотоксичности лекарственных средств, включающий использование роговицы эмбриональных цыплят и клеточной технологии, причем выделяют роговицу эмбрионов цыплят 7-14 дней гестации, которую измельчают и замораживают в парах жидкого азота до -180°С, при оценке цитотоксичности лекарственных средств замороженный материал подвергают медленной разморозке, переносят в центрифужную пробирку и трехкратно отмывают в растворе NaCl 0,9%, а затем измельчают клеточные элементы до получения гомогенной клеточной суспензии, осаждают строму в центрифуге, надосадок, содержащий клетки роговицы, переносят в стерильную пробирку и вновь осаждают клетки, супернатант удаляют, а к осадку, содержащему роговичные клетки, добавляют 1 мл раствора NaCl 0,9% и ресуспендируют, в полученной суспензии считают цитоз и определяют жизнеспособность клеток по окрашиванию их ДНК-флуорохромами на проточном цитофлюориметре, затем раствором NaCl 0,9% суспензию клеток роговицы доводят до концентрации 5,0·105 клеток в 1 мл и переносят в культуральные флаконы и добавляют исследуемые препараты, для контроля в один из флаконов добавляют NaCl 0,9%, дальнейшую инкубацию проводят в культуральных флаконах в СO2 инкубаторе в течение суток, далее суспензии клеток переносят в центрифужные пробирки, центрифугируют для осаждения клеток и отбирают по 1 мл суспензии каждого опыта для исследования цитотоксичности по окрашиванию клеток ДНК-флуорохромами, цитотоксичность исследуемых веществ оценивают на проточном цитофлюориметре. Данное изобретение отличается высокой чувствительностью и специфичностью определения цитотоксичности. Объективность интерпретирования результатов позволяет использовать заявленный способ для широкого круга препаратов. 3 табл., 1 ил.
Поиск патентов
Получить полное описание патента